Обследование при волчаночном нефрите (дсДНК и АНФ) в сыворотке крови

Код: 520
Венозная кровь
10 дней

Лабораторная диагностика системных заболеваний соединительной ткани. Антифосфолипидный синдром

Описание | Подготовка | Показания к назначению

Описание анализа

При системной красной волчанке (СКВ) иммунная система атакует свои собственные клетки. Образуются белки класса иммуноглобулинов — антитела. Они соединяются с белками клубочков почек, что становится причиной аутоиммунного воспаления почек — волчаночного нефрита.

Выявление в крови большого количества антител к частицам ядра (антинуклеарному фактору, АНФ) и двуспиральной ДНК (дсДНК) типично для тяжелых форм нефрита при СКВ. Нарастание титра (повышение) означает обострение заболевания, а снижение — эффективность лечения.

Антитела к собственной двухспиральной ДНК (компонент клеточного ядра) синтезируются клетками иммунной системы. Появление их в крови типично для аутоиммунных болезней, но особенно для системной красной волчанки.

Комплекс антиген (дсДНК) и антитело (IgG и IgM) вызывают иммунное воспаление мелких сосудов, кожи, почек, суставов и внутренних органов. Антитела к дсДНК при системной красной волчанке позволяют поставить диагноз при нечеткой клинической картине, сомнительных результатах других анализов, предсказать риск ее развития при наследственной предрасположенности.

Антитела к двуспиральной (нативной) ДНК – это разновидность антинуклеарных антител (АНА). Обычно ядерные антигены, такие как двухцепочечная (нативная) ДНК, недоступны для иммунной системы, поскольку они ограничены пространством ядра и митохондрий внутри клеток, и быстро разрушаются ДНКазами в цитоплазме и эндосомах. Однако ДНК может высвобождаться из мертвых и умирающих, подвергающихся апоптозу клеток после воздействия ультрафиолетового света, при инфекции или применении некоторых лекарств. В ходе апоптоза (программированный процесс смерти клеток, подлежащих удалению) происходит фрагментация ДНК и образование апоптотических телец, которые содержат связанные с ДНК микрочастицы и в норме быстро удаляются фагоцитами. Хроматин в апоптотических частицах способен индуцировать образование антител к дс-ДНК.

Присутствие аутоантител к дс-ДНК в высоком титре характерно для системной красной волчанки (СКВ). Пусковым фактором может служить инсоляция, инфекция, лекарственные воздействия. Важным фактором патогенеза при этом служат генетически детерминированные или приобретенные дефекты апоптоза. Значимую роль играют гормональные факторы (среди пациентов с СКВ преобладают женщины).

Высокомолекулярная ДНК может высвобождаться при процессах некроза после лизиса клетки. Выброс хроматина из клеток происходит в комплексе с содержимым гранул и цитоплазмы нейтрофилов в составе нейтрофильных внеклеточных ловушек (neutrophil extracellular traps – NET) при инфекциях. Сниженное устранение остатков ядерного материала может коррелировать с повышением продукции антител к ядерным антигенам и усилением их повреждающего действия.

«Золотой стандарт» выявления антинуклеарных антител (АНА) и диагностики аутоиммунных заболеваний — это определение антинуклеарного фактора (АНФ).

Причина системных заболеваний соединительной ткани (СЗСТ) взаимосвязана с повышенной выработкой антител к своим же клеткам и расстройствами в иммунной системе. Аутоантитела к компонентам ядер клеток — антинуклеарные антитела (АНА) — взаимодействуют с антигенами цитоплазмы, с белками ядра клетки и нуклеиновыми кислотами, вследствие чего возникают воспалительные изменения в тканях и органах, выраженное утомление, боли в суставах и мышцах, потеря веса, кожные изменения.

При многих аутоиммунных заболеваниях обнаруживаются АНА, но наиболее характерны для системной красной волчанки (СКВ). У больных системными заболеваниями соединительной ткани более, чем у 90%, встречается АНА, которых насчитывается около 200 видов и объединенных общим названием — антинуклеарный фактор (АНФ)

Важное клиническое значение и определение тактики дальнейшего обследования пациента имеет тип свечения, по которому можно установить мишени антинуклеарных антител.

Основные типы окрашивания: ядрышковый, гранулярный (мелко-/крупно-), центромерный, периферический и цитоплазматический. Каждому типу свечения присущи очень характерные признаки, которые позволяют отличить один вариант от другого.

Гомогенное (диффузное) окрашивание при наличии антител к двуспиральной ДНК и белкам гистонам — характерно для лекарственной волчанки и СКВ.

При периферическом свечении — периферическое распределение хроматина в ядре, связано с антителами к ДНК и специфично для СКВ.

Гранулярное (сетчатое, крапчатое) окрашивание наблюдается чаще, менее специфичное, встречается при большинстве аутоиммунных заболеваний. В данном случае аутоантигенами являются нуклеопротеиновые комплексы в ядре (Sm, PCNA, SS-A, U1-RNP, SS-B антигены).

На смешанное заболевание соединительной ткани указывают очень высокие титры АНФ с крупногранулярным типом свечения.

Нуклеарное (ядрышковое) окрашивание связано с образованием антител к компонентам ядрышка (NOR, PHК-полимераза-1, PM/Scl, U3RNP), выявляется при болезни Шегрена, склеродермии. Иногда АНА увеличиваются и при кожных заболеваниях (пузырчатке, псориазе), при эндокринных заболеваниях (тиреоидите, сахарном диабете 1-го типа, тиреотоксикозе, полиэндокринном синдроме), при беременности, у больных на гемодиализе, после трансплантации органов и тканей.

Центромерное свечение обнаруживают антитела к хромосомным центромерам, что характерно для CREST-синдрома (формы склеродермии).

Антитела к тРНК-синтетазе встречаются при цитоплазматическом типе свечения, в частности к Jo-1, что характерно для полимиозита и дерматомиозита. Характерно такое свечение при первичном билиарном циррозе, аутоиммунном гепатите.

Одновременное выявление разных типов свечения указывает на присутствие разных видов антител.

Мелкогранулярное свечение обнаруживается у здоровых людей чаще при низких, умеренных или высоких титрах АНА, но в норме не должны определяться гомогенные или крупнозернистые типы свечения.

Дальнейшая тактика лечения пациента зависит от оценки результатов типа свечения, согласно им уже разрабатываются и назначаются дополнительные исследования, уточняющие спектр АНА.

Подготовка к сдаче

предпочтительно выдержать 4 часа после последнего приема пищи;

за 1 час до исследования лучше воздержаться от курения.

Показания к назначению

Обнаружение типичных изменений в анализе мочи: белок от 200 мг/сутки, эритроциты, лейкоциты, цилиндры, уменьшение суточного количества.
Отеки на лице и голенях (сильнее выражены по утрам).
Повышенное артериальное давление.
Ухудшение самочувствия пациента с СКВ: тошнота, рвота, головная боль, кожный зуд.
Оценка степени тяжести волчаночного нефрита и результатов лечения волчаночного нефрита.

Противопоказания

Абсолютных противопоказаний нет

К какому врачу обратиться?

- Ревматолог

- Терапевт

- Врач общей практики

- Педиатр

- Нефролог

- Дерматолог

Источники

Созина А. В., Неустроева Ю. А., Тихомирова Т. А. Сочетанная встречаемость аутоантител у больных с диффузными болезнями соединительной ткани // Медицинская иммунология, 2017. — 69-76 с.
Клюквина Н. Г. Клиническое значение лабораторных нарушений при системной красной волчанке. Современная ревматология. 2014:41—47.