Определение антител к основным антигенам СКВ (дсДНК и АНСА) в сыворотке крови

Код: 514
Венозная кровь
7 дней

Лабораторная диагностика системных заболеваний соединительной ткани. Антифосфолипидный синдром

Описание | Подготовка | Показания к назначению

Описание анализа

Антитела к собственной двухспиральной ДНК (компонент клеточного ядра) синтезируются клетками иммунной системы. Появление их в крови типично для аутоиммунных болезней, но особенно для системной красной волчанки.

Комплекс антиген (дсДНК) и антитело (IgG и IgM) вызывают иммунное воспаление мелких сосудов, кожи, почек, суставов и внутренних органов. Антитела к дсДНК при системной красной волчанке позволяют поставить диагноз при нечеткой клинической картине, сомнительных результатах других анализов, предсказать риск ее развития при наследственной предрасположенности.

Антитела к двуспиральной (нативной) ДНК – это разновидность антинуклеарных антител (АНА). Обычно ядерные антигены, такие как двухцепочечная (нативная) ДНК, недоступны для иммунной системы, поскольку они ограничены пространством ядра и митохондрий внутри клеток, и быстро разрушаются ДНКазами в цитоплазме и эндосомах. Однако ДНК может высвобождаться из мертвых и умирающих, подвергающихся апоптозу клеток после воздействия ультрафиолетового света, при инфекции или применении некоторых лекарств. В ходе апоптоза (программированный процесс смерти клеток, подлежащих удалению) происходит фрагментация ДНК и образование апоптотических телец, которые содержат связанные с ДНК микрочастицы и в норме быстро удаляются фагоцитами. Хроматин в апоптотических частицах способен индуцировать образование антител к дс-ДНК.

Присутствие аутоантител к дс-ДНК в высоком титре характерно для системной красной волчанки (СКВ). Пусковым фактором может служить инсоляция, инфекция, лекарственные воздействия. Важным фактором патогенеза при этом служат генетически детерминированные или приобретенные дефекты апоптоза. Значимую роль играют гормональные факторы (среди пациентов с СКВ преобладают женщины).

Высокомолекулярная ДНК может высвобождаться при процессах некроза после лизиса клетки. Выброс хроматина из клеток происходит в комплексе с содержимым гранул и цитоплазмы нейтрофилов в составе нейтрофильных внеклеточных ловушек (neutrophil extracellular traps – NET) при инфекциях. Сниженное устранение остатков ядерного материала может коррелировать с повышением продукции антител к ядерным антигенам и усилением их повреждающего действия.

Антитела к нуклеосомам – высокочувствительный и специфичный маркер системной красной волчанки (СКВ), который используется для диагностики, оценки прогноза и контроля лечения этого заболевания.

Нуклеосомы представляют собой структурные единицы хроматина, состоящие из ДНК и гистоновых белков. Вокруг ядра нуклеосомы, состоящего из белков гистонов Н2А, Н2В, Н3 и Н4, обернуто 146 пар нуклеотидов ДНК, что составляет два с половиной витка. Между нуклеосомами находится промежуток из линейной ДНК и гистона Н1. Такая структура укладки ДНК позволяет компактно упаковать генетический материал в составе хромосом клетки. Значительное количество свободных нуклеосом может образоваться при программированной клеточной гибели (апоптозе). Свободные нуклеосомы рассматриваются в качестве основного иммуногена, стимулирующего иммунный ответ Т- и В-клеток при системной красной волчанке (СКВ). Вероятным источником свободных нуклеосом при этом заболевании являются клетки эпителия и лимфоциты, которые подвергаются избыточному апоптозу.

Антитела к нуклеосомам являются одними из первых аутоантител, которые формируются в организме в ходе развития СКВ. Антитела к нуклеосомам, как и антитела к дс-ДНК, могут играть большое значение в патогенезе поражения почек при волчаночном нефрите. Нуклеосомы, находящиеся в крови, обладают высокой аффинностью к гепаран-сульфату базальной мембраны клубочков почек и способны откладываться на ней, приводя к связыванию антител к нуклеосомам и антител к дс-ДНК с последующим развитием гломерулонефрита.

Совокупная частота выявления антител к нуклеосомам при СКВ составляет 60-90%, причем антитела к нуклеосомам отмечаются несколько чаще, чем антитела к ДНК (40-50%), поэтому могут позволить диагностировать СКВ у пациентов без антител к двуспиральной ДНК. Антитела к нуклеосомам отмечают у 40-70% пациентов с классической красной волчанкой с поражением кожи и внутренних органов и у 80% больных СКВ с поражением почек. Титры антител коррелируют с активностью заболевания. Редко они обнаруживаются у больных с синдромом Шегрена (5-8%) и с той же частотой при смешанном заболевании соединительной ткани. Антитела к нуклеосомам не выявляются у больных с другими заболеваниями соединительной ткани и здоровых доноров, что позволяет отнести нуклеосомные антитела в разряд высоко специфических маркеров СКВ. За счет перекрестной реакции с антителами к гистонам антитела к нуклеосомам могут использоваться в диагностике лекарственной волчанки.

Для выявления антител к нуклеосомам в данном тесте используется иммуноферментный тест (ИФА) второго поколения, основным отличием которого является применение высокоочищенных нуклеосом, что обеспечивает специфичность определения данных аутоантител для диагностики СКВ более 95%.

Подготовка к сдаче

предпочтительно выдержать 4 часа после последнего приема пищи;

за 1 час до исследования лучше воздержаться от курения.

Показания к назначению

1. Симптомы системной красной волчанки (СКВ):

красная «бабочка» и высыпания на лице,
сыпь на верхней части туловища, руках.
боли в суставах.

2. Выявленные при обследовании типичные поражения почек, легочной ткани, околосердечной сумки.

3. Для оценки активности патологического процесса (СКВ).

4. Контроль эффективности терапии у пациентов с установленным диагнозом (СКВ).

5. Рекомендуемая частота 1 раз в 1-3 месяца при высокой активности заболевания, 1 раз в 3-6 месяцев при низкой активности заболевания.

6. Выявление в сыворотке антинуклеарных антител (ANA), особенно если получен гомогенный или зернистый (крапчатый) тип иммунофлуоресцентного свечения ядра.

7. Подозрение на системное аутоиммунное заболевание и СКВ: наличии лихорадки, кожных высыпаний, артралгий/артрита, пневмонита, перикардита, эпилепсии, поражения почек.

Противопоказания

Абсолютных противопоказаний нет

К какому врачу обратиться?

- Ревматолог

- Терапевт

- Врач общей практики

- Педиатр

- Иммунолог

Источники

Лапин С.В. Тотолян А.А. Иммунологическая лабораторная диагностика аутоиммунных заболеваний/ Издательство «Человек», СПб – 2010. 272 c.
Насонов Е.Л., Александрова Е.Н. Современные стандарты лабораторной диагностики ревматических заболеваний. Клинические рекомендации / БХМ, М - 2006.
Conrad K, Schlosler W., Hiepe F., Fitzler M.J. Autoantibodies in Organ Specific Autoimmune Diseases: A Diagnostic Reference/ PABST, Dresden – 2011. 300 p.
Conrad K, Schlosler W., Hiepe F., Fitzler M.J. Autoantibodies in Systemic Autoimmune Diseases: A Diagnostic Reference/ PABST, Dresden – 2007. 300 p.
Gershvin ME, Meroni PL, Shoenfeld Y. Autoantibodies 2nd ed./ Elsevier Science – 2006. 862 p.
Shoenfeld Y., Cervera R, Gershvin ME Diagnostic Criteria in Autoimmune Diseases / Humana Press – 2008. 598 p.
Инструкции к набору реагентов.
Камышников В. С. Клиническая лабораторная диагностика (методы и трактовка лабораторных исследований): Руководство. — М.: МЕДпресс-информ, 2017. — 720 с.
Созина А.В., Неустроева Ю.А., Тихомирова Т.А. Сочетанная встречаемость аутоантител у больных с диффузными болезнями соединительной ткани // Медицинская иммунология, 2017. — 69-76 с.